蝙蝠侠系列中的很多经典角色都会出现，包括黑面具、企鹅角色、死亡之钟、贝恩、死亡射手、阿纳奇、戈登警长、小丑、铜斑蛇、萤火虫人等等。
《蝙蝠侠:阿卡姆起源》发布了第三个刺客角色——铜斑蛇，他出现在《死亡射击》和《丧钟》之后。在翻拍的《新52》漫画中，铜头蛇是一个女性角色，但很多粉丝都记得，在原版漫画中，铜头蛇是一个男性角色，长着一张丑陋的脸，一张像蛇一样的脸。但在重启版中，DC把这个角色换成了一个擅长软件的女人。DC专门为这个新角色的隆重登场制作了一个角色预告片。
蝙蝠侠:阿卡姆的起源:杀手终于出现了——杀手鳄鱼出现了。
杀手鳄鱼的英文名是Killer Croc，或简称Croc。这个重量级游戏角色是由杰瑞·康威和唐·牛顿创造的。
杀手鳄鱼一开始只是一个很普通的角色，一个蜥蜴版的弗兰肯斯坦，一个力量无穷但智商很低的蠢角色。在游戏中，你通常会被打败。随着时间的演变，杀手鳄鱼进化成了高智商的罪犯，纠集反派对付蝙蝠侠。